원숭이 수두 바이러스 감염 검출을 위한 실험실 지침
세계보건기구(WHO) 사무총장은 지난 2022년 7월 23일 전 세계적으로 확산되는 원숭이두창 발병을 국제적 공중보건 비상사태(PHEIC)로 선언했습니다. WHO에 따르면 92개 국가/영토에서 35,000건 이상의 사례가 발생했으며 8월 17일 현재 사망. 대부분의 보고된 사례(여행 이력 포함)는 유럽과 북미 지역을 여행했습니다.
원숭이두는 원숭이두 바이러스(MPXV) 감염에 의해 발생하는 희귀 질병입니다. 이 바이러스는 천연두를 유발하는 동일한 바이러스 계열에 속하는 외피 이중 가닥 DNA 바이러스입니다. 이 바이러스는 체액, 피부 병변 또는 발열, 두통, 근육통과 같은 증상이 있는 내부 점막 표면과의 접촉을 통해 전염될 수 있습니다. 원숭이두의 잠복기는 보통 6일에서 13일이지만 5일에서 21일(약 3주)까지 다양할 수 있습니다.
WHO에 따르면 가장 좋은 진단 표본은 발진(피부, 체액, 딱지)에서 직접 채취하거나 생검이 가능한 경우입니다. 항원 및 항체 검출과 같은 다른 방법은 오르토폭스바이러스를 구별하지 못하기 때문에 유용하지 않을 수 있습니다.
실험실에서 원숭이 수두가 의심되거나, 가능성이 있거나, 확인된 사례의 표본을 조작할 때는 위험 기반 접근이 권장됩니다. 따라서 위험군 3 병원체로 분류되는 MPXV의 존재를 검출하는 절차는 아래에 표시된 장비 목록을 사용하여 Biosafety Level 2 실험실에서 수행되어야 합니다.
Monkeypox 바이러스 탐지를 위한 장비 가이드
검체 및 시약 보관
MPXV 표본은 2°C ~ 8°C에서 냉장 보관하거나 수집 후 1시간 이내에 냉동(-20°C 이하)해야 합니다. 운송 시간이 7일을 초과하는 경우 검체는 -20°C 이하에서 보관해야 합니다. 한편, 장기간 표본 보관을 위해 -70°C가 권장됩니다(>수집일로부터 60일).
Biobase 실험실용 냉장고, 실험실용 냉동고 및 초저온 냉동고에는 중요한 보관 조건이 필요한 온도에 민감한 생물학적 시료의 보관에 적합한 잘 설계된 냉동 시스템과 고품질 재료가 장착되어 있습니다.
시료 취급 및 준비
MPXV는 오염된 물질이나 부적절한 방법으로 인해 표본 처리 단계에서 전염될 수 있습니다. 결과적으로 증가된 생물학적 안전 조치가 관찰되어야 합니다. 검체를 비활성화하기 전에 MPXV가 의심되는 환자의 검체를 기능적인 Class II 생물안전 캐비닛에서 준비해야 합니다. 그러나 이것은 적절하게 비활성화된 표본에는 필요하지 않습니다.
생물 안전 캐비닛이 제공하는 보호 외에도 Biobase 클래스 II 생물 안전 캐비닛은 사용자 친화적인 기능을 준수하는 NSF 49 및 EN 12469이며 향상된 안전성을 위해 모든 외부 및 내부 페인트 표면에 항균 분말로 코팅되어 있습니다. 시료의 액체 및 고체 성분을 분리하려면 원심분리기가 필요합니다. 절차에 필요한 경우 안전 컵 또는 밀폐형 로터를 사용하는 것이 좋습니다.
탐지 및 분석
MPXV 감염을 확인하기 위해 핵산 증폭 검사(NAAT)가 수행됩니다. 고유한 바이러스 DNA 시퀀스를 감지하기 위해 실시간 PCR 또는 기존 PCR(중합효소 연쇄 반응)이 사용됩니다. 바이러스 탐지에는 두 가지 단계가 있습니다. 첫 번째 PCR은 orthopoxviruses를 감지하지만 두 번째 PCR(또는 시퀀싱)은 MPXV를 특이적으로 감지하는 동안 종을 식별하지 않습니다.
Real-Time PCR Thermal Cycler는 바이러스 분석을 위한 효율적인 핵산 증폭을 제공합니다. Biobase는 PCR 프로그램 입력, 모니터링 및 분석에서 독립 실행형 작동을 위한 내장 컴퓨터가 있는 새로운 Swift™ PCR Thermal Cyclers를 제공합니다.